بررسی عملکرد تولیدی و بیان ژن رمزکننده پروتئین های شوک حرارتی کوچک مولکول (shsps) در واریته های کرم ابریشم در پاسخ به شوک های حرارتی

در این آزمایش کمیت بروز ژن پروتئین های شوک حرارتی کوچک مولکول با روش qrt-pcr اندازه گیری شد. rna نمونه گروه های شاهد و نمونه های تیمار حرارتی 45 درجه به مدت 35 دقیقه پس از استخراج به cdna تبدیل شدند. بروز ژن پروتئین های شوک حرارتی کوچک مولکول القاء شده براساس مقایسه با گروه شاهد (دارای هر دو ژن هدف و مرجع) با دستگاه real time pcr اندازه گیری شد. هفت ژن پروتئین های شوک حرارتی کوچک مولکول کرم ابریشم در بافت چربی واریته های 103، 104، 107 و 110 در زمان های صفر، دو، چهار و 24 ساعت پس از شوک حرارتی در هر دو جنس نر و ماده بررسی شدند. در بین هفت ژن مورد بررسی بیشترین میزان بروز برای ژن shsp19.9 و کمترین میزان بروز برای ژن shsp25.4 بود که با مقادیر بروز shsp21.4 تفاوت معنی داری نداشت. همچنین واریته 110 کمترین میزان بروز ژن های shsp را نشان داد. بیشترین میزان بروز ژن های shsp به طور معنی داری در واریته 107 مشاهده شد (0001/0>p). همچنین تجزیه آماری تفاوت معنی دار در بروز shsp ها را در دو جنس نر و ماده مشخص کرد که جنس نر بروز ژن بیشتری نسبت به جنس ماده داشت(0001/0>p). از دیگر نتایج تجزیه آماری تفاوت معنی دار زمان دو ساعت پس از شوک حرارتی با ساعت صفر و 24 بود؛ به طوری که زمان دو ساعت پس از شوک حرارتی اوج بروز shsp ها را نشان داد (0001/0>p)، که با ساعت چهار تفاوت معنی داری نداشت. اندازه گیری های بروز ژن ها نشان داد که shsp19.9 ,shsp20.1 ,shsp20.4 ,shsp20.8, shsp25.4 وshsp23.7 در کرم ابریشم تحت تأثیر تنش حرارتی بروز افزایشی داشته و ژن shsp21.4 بروز کاهشی نشان می دهد. علاوه بر این در این تحقیق 4 ژن مرجع (rpl27a, ef1a, gapdh و ubiquitin) مورد بررسی و مقایسه قرار گرفت که ژن rpl27a به عنوان ژن مرجع مناسب برای آزمایش های کمی بروز ژن در کرم ابریشم تأیید شد.